柏凤1, 杨俊伟1 闻萍1 王晓华1 方丽1 曹红娣1, 俞伟男2, 谭若芸1
南京医科大学第二附属医院肾脏病中心, 江苏省淮安市第二人民医院内分泌科
目的:通过观察高糖是否引起小鼠足细胞发生上皮-间叶细胞转分化现象,探讨糖尿病肾小球损伤的可能机制。
方法:以小鼠永生化足细胞株为研究对象,予不同浓度葡萄糖(12.5mM, 25mM, 50mM)处理该细胞36小时,并设低糖和甘露醇(浓度50mM)处理组为对照组。采用蛋白免疫印迹和间接免疫荧光染色方法检测a-平滑肌细胞肌动蛋白(a-SMA),CD2-相关蛋白(CD2AP)和Wilms' 肿瘤1基因(WT-1)蛋白的表达。
结果:低糖(5.6mM)和甘露醇(50mM)处理条件下小鼠足细胞表达高水平WT-1、CD2AP,基本不表达a-SMA和FN;而予不同浓度葡萄糖处理36小时后, 足细胞中a-SMA和FN表达水平呈剂量依赖性升高(P<0.05)。间接免疫荧光染色结果也显示:与低糖组相比,高糖组中a-SMA阳性的足细胞比例明显增加(P<0.05)。同时,蛋白免疫印迹结果还表明高糖可呈剂量依赖性方式抑制WT-1和CD2AP的表达(P<0.05)。
结论:在高糖条件下,足细胞发生向间叶细胞表型的转分化可能是引起足细胞功能失调,进而引起糖尿病肾小球损伤发生的作用机制之一。